zKirus病毒规模化生产转染试剂
zKirus简介 zKirus为本公司研发的病毒规模化生产专用转染试剂,以特异的高纯度阳离子聚合物为主要配方,可用于慢病毒、反转录病毒及反向遗传学过程的转染,产生高滴度病毒。本包装zKirus体积为400µl,正常可用于40个100mm培养皿的病毒包装操作(反向遗传学操作推荐用60mm培养皿)。
操作方法 (以100mm培养皿为例,其他请按照培养面积等比例调整):
1、 包装细胞(一般为293T或其衍生细胞株)转染前30min-2h换含血清的完全培养基7ml;
2、 取10µl zKirus与0.5ml含双抗培养基轻柔混匀;
3、 取30µg病毒载体/包装质粒与0.5ml含双抗培养基轻柔混匀;
4、 室温静置5min;
5、 将2中zKirus溶液加入3中,轻柔吸打混匀;
6、 室温静置15-30min;
7、 将1ml转染混合液轻柔加入包装细胞中,轻柔混匀;
8、 转染48-72h收集细胞上清,离心弃沉淀,0.45µm滤器过滤,得到病毒悬液。
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